LIU Shuting, WANG Ying, WANG Zhihui, et al. Repairing effect of resistant starch from purple speckled kidney beans(Phaseolus vulgaris) on liver and intestinal barrier injury in rats with hyperlipidemia[J]. Food Science, 2020, 41(21):106-112. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630--073.

随着消费者生活方式和膳食结构改变，高脂血症患病率逐年攀升。大量数据表明，中国成年人高脂血症患病率高达18.6%[1-2]。高脂血症是心脑血管疾病如动脉粥样硬化、缺血/溢血性中风等病症的重要发病因素[3]。高脂血症是指由体内血脂代谢紊乱引发血脂异常的一类代谢综合类疾病统称，而肝脏作为身体代谢的重要器官，在调节机体能量平衡方面起关键作用[4-6]。当人体摄入和消耗的能量不平衡时，脂肪组织中过量的游离脂肪酸会将脂肪聚集在肝细胞中，使肝脏组织病变形成肝硬化、脂肪肝等病症[7]。同时，高脂血症诱发机体自由基蓄积、免疫功能紊乱、肠道菌群失调，进而损伤肠道功能。现阶段针对高脂血症及其并发症的传统方法一般采取多种降脂药物联合干预的方式，其成本高昂、毒副作用大[8-9]。因此，探寻一种可通过膳食补充降低血液中甘油三酯（triglyceride，TG）和总胆固醇（total cholesterol，TC）含量，有效改善高脂血症的天然产物具有重要意义。

抗性淀粉是指在健康人体小肠中不被吸收，但在结肠中能被微生物完全或部分利用发酵产生对人体有益的短链脂肪酸的淀粉及其降解物，具有降低餐后血糖浓度、控制体质量、改善肠道健康等生理功能[10-11]。目前，对抗性淀粉生理功能的研究主要集中在其参与糖代谢、调节肠道菌群、预防结肠癌等方面，在脂质代谢方面的研究则更偏向于高直链玉米来源的抗性淀粉，Polakof等[7]研究发现Hi-Maize 260玉米抗性淀粉能有效改善高脂血症大鼠胰岛素抵抗造成的肝脏损伤。而对于杂粮豆类抗性淀粉的降脂护肝功能，尤其是对高脂造成的肠屏障损伤修复方面研究报道较少。芸豆，作为小宗杂粮豆类，具有极高的食用和药用价值。本实验以垦区主产紫花芸豆为原材料制备抗性淀粉，以高脂血症大鼠模型为对象，研究芸豆抗性淀粉对血脂异常导致的肝脏和肠屏障损伤的修复作用，旨在拓宽芸豆的应用领域，为芸豆抗性淀粉在高脂血症疾病方面的调节作用提供理论依据及数据支撑。

1 材料与方法

1.1 动物、材料与试剂

清洁级雄性Wistar大鼠，体质量（200±20）g，生产许可证号：SCXK（辽）2015-0001，购自辽宁长生生物技术股份有限公司。

紫花芸豆抗性淀粉由实验室自制；高脂血症饲料北京科澳协力饲料有限公司；TG测试盒、TC测试盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）测试盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）测试盒南京建成生物工程研究所；天冬氨酸转移酶（aspartate aminotransferase，AST）试剂片、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）试剂片、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALKP）试剂片 北京安普生化科技有限公司；D-乳酸（D-lactic acid，D-LA）、二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）测试盒 苏州卡尔文生物技术有限公司；辛伐他汀片 山东鑫齐药业有限公司；其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

Vet Test 8008全自动生化分析仪 北京安普生化科技有限公司；A360紫外分光光度计 上海翱艺仪器有限公司；Multiskan Sky全波长酶标仪 美国赛默飞世尔科技有限公司；SHP-250生化培养箱 上海森信实验仪器公司；AL104型电子天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司。

1.3 方法

1.3.1 紫花芸豆抗性淀粉的制备

工艺流程：紫花芸豆粉→碱法提取[12]→淀粉→调浆→预糊化→超声-微波协同处理[13]→压热→普鲁兰酶酶解[14]→灭酶→老化→烘干→粉碎过筛→纯化[15]→紫花芸豆抗性淀粉

操作要点： 1 ） 碱法提取： 氢氧化钠溶液（0.2 g/100 mL）浸提时间3 h，固液比1∶7；2）超声-微波协同压热酶解法制备紫花芸豆抗性淀粉：淀粉悬浮液质量分数20%，超声-微波协同反应仪温度40 ℃，微波功率300 W，超声-微波协同处理20 min后于121 ℃压热30 min，冷却后调节至pH 5，酶添加量（9 ASPU/g，以干基质量计），55 ℃恒温酶解10 h，沸水浴灭酶。老化条件：4 ℃老化24 h。纯化后抗性淀粉平均提取率为24.17%。

1.3.2 动物分组与造模

健康Wistar大鼠（雄性）48 只，饲养在动物实验专用大鼠笼中。饲养条件：模拟循环光照12 h、室温（24±2）℃、相对湿度（50±5）%。实验大鼠适应性喂养1 周，称量体质量并记录。