中国修复重建外科杂志
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中药学论文_基于Wnt/β-catenin通路探讨益气活

文章目录

1 材料与方法

1.1 实验动物

1.2 药物、试剂与仪器

1.3 分组与造模

1.4 给药方法

1.5 观察指标与方法

    1.5.1 心功能指标检测

    1.5.2 标本制备

    1.5.3 HE染色检测

    1.5.4 Masson染色检测

    1.5.5 TUNEL染色检测

    1.5.6 RT-qPCR法检测

    1.5.7 ELISA法检测

    1.5.8 Western Blot法检测

1.6 统计方法

2 结果

2.1 各组大鼠心功能指标比较

2.2 各组大鼠心肌组织病理学变化比较

2.3 各组大鼠心肌细胞凋亡情况比较

2.4 各组大鼠心肌凋亡相关基因mRNA表达水平比较

2.5 各组大鼠血清LDH、CK、CK-MB含量比较

2.6 各组大鼠心肌组织Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达比较

3 讨论

文章摘要:【目的】探讨益气活血方对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌损伤的修复作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、Wnt-C59(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组,每组15只。模型组、中药组、Wnt-C59组大鼠采用冠状动脉前降支结扎法建立AMI模型,假手术组大鼠仅打开胸腔后缝合。成功造模后,中药组大鼠灌胃益气活血方药液6.48 g·kg-1·d-1,Wnt-C59组大鼠灌胃Wnt-C59 30 mg·kg-1·d-1,假手术组和模型组大鼠灌胃0.9%氯化钠(NaCl)溶液20 mL·kg-1,共4周。给药结束后,评价大鼠心功能变化,采用苏木素-伊红(HE)法和Masson染色法观察大鼠心肌组织病理学改变,脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的核苷酸(dUTP)缺口末端标记法(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡情况,实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)法检测心肌组织半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清心肌损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、CK同工酶(CK-MB)的含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织Wnt3a、β-catenin及β-catenin靶基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、C-myc蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠心功能显著降低,出现明显心室扩张和重构,心肌组织排列紊乱、纤维化明显、细胞凋亡增加,Caspase-3、Bax m RNA表达水平上调,Bcl-2 m RNA表达水平下调,血清心肌损伤因子含量显著升高,心肌组织Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1、C-myc蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组和Wnt-C59组大鼠心功能指标得到显著改善,心肌组织排列较为整齐,胶原纤维沉积减少,细胞凋亡减少,Caspase-3、Bax mRNA表达水平降低,Bcl-2 m RNA表达水平增加,血清心肌损伤因子含量降低,心肌组织Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1、C-myc蛋白表达水平降低(P<0.05)。【结论】益气活血方可能通过调节Wnt/β-catenin信号通路改善AMI大鼠心肌损伤。

文章关键词:

论文DOI:10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2021.12.028

论文分类号:R285.5