文章摘要:背景微组织是种子细胞在细胞-细胞或细胞-细胞外基质（extracellular matrix, ECM）作用下聚集而成的微型组织，这种三维（three-dimension,3D）培养方式有利于提高细胞活性，提高组织修复效果，然而微组织在神经组织工程中的研究却很少。目的 将脂肪来源间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ASCs）构建成微组织，探索微组织对大鼠坐骨神经缺损模型的早期修复效果。方法 提取ASCs进行鉴定；利用悬浮液滴法和低黏附细胞培养板法构建微组织，并对其性质进行研究；将微组织与大鼠背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）进行直接和间接共培养，观察微组织对DRG轴突生长的影响；利用静电纺丝机构建聚己内酯（polycaprolactone,PCL）神经导管，并验证其取向性；最后取SD大鼠24只，随机分为空导管组（Hollow）、2D细胞组（2D）、微组织组（Microtissue）和自体神经移植组（ANG），每组6只。构建坐骨神经1cm缺损模型，分别采用PCL导管桥接后注射培养基、PCL导管桥接后注射2D ASCs、PCL导管桥接后注射微组织和自体神经反向移植。术后4周取出神经移植物进行组织学评价。结果 成功提取ASCs，能够表达间充质干细胞表面标记蛋白CD73、CD90、CD105。微组织构建后，对其形态和直径进行连续7d的动态观察，微组织的直径与细胞数量正相关，且随着培养时间延长，微组织呈现“压实”的状态，直径逐渐变小。在微组织和DRG间接共培养体系中，Microtissue组的轴突长度明显长于2D组（P<0.05）和单纯培养基组（Control组）（P<0.05）。在微组织和DRG直接共培养体系中，DRG发出的轴突与附近的微组织紧密相连。PKH26标记的ASCs在PCL薄膜上呈取向性排列。动物实验结果表明，Microtissue组轴突生长明显优于2D组（P<0.05）和Hollow组（P<0.05）。结论 微组织可以促进DRG轴突生长，可有效的促进坐骨神经缺损大鼠模型的神经再生。

文章关键词:

论文分类号:R745